分光光度分析中經(jīng)常出現(xiàn)波動(dòng)的問(wèn)題，吸光度無(wú)法穩(wěn)定在一個(gè)恒定的數(shù)值上。這種情況常見(jiàn)于老式的721，722，7230等機(jī)型上，近幾年出的島津2550 系列，瓦里安的Carry系列，普析的1901系列等的新式儀器，儀器的波動(dòng)一般比較小。如果出現(xiàn)這種情況，一般采用下面方式處理：
1. 先確定待測(cè)溶液的穩(wěn)定性
之前就有版友出現(xiàn)過(guò)這種情況，說(shuō)吸光度波動(dòng)很大，隨時(shí)間的增加，吸光值減小/增大等的問(wèn)題，先別懷疑儀器，假設(shè)儀器是穩(wěn)定的，驗(yàn)證待測(cè)溶液是否穩(wěn)定。如 果溶液不穩(wěn)定，那就需要靜置一段時(shí)間，等穩(wěn)定了再測(cè)。這里我可以建議一點(diǎn)，就是做個(gè)簡(jiǎn)單的試驗(yàn)設(shè)計(jì)，以時(shí)間為橫坐標(biāo)，以吸光度為縱坐標(biāo)，看看吸光度隨時(shí)間 的變化曲線如何，等到穩(wěn)定以后，下次記住這個(gè)時(shí)間，以后就直接靜置這么長(zhǎng)時(shí)間，直接測(cè)定了。
簡(jiǎn)單做了一個(gè)圖，看看吸光度隨時(shí)間的變化曲線，由圖1可以看出，在0-11分鐘，顯色劑和組分還在反應(yīng)，如果在這個(gè)時(shí)間段檢測(cè)，吸光度肯定不穩(wěn)定；在 11-13分鐘時(shí)，吸光值基本穩(wěn)定，可以上機(jī)檢測(cè)；在13分鐘以后，開(kāi)始有點(diǎn)褪色了。所以，下次直接靜置11-分鐘后開(kāi)始上機(jī)測(cè)定就可以了。
還有一點(diǎn)很重要，就是這種不穩(wěn)定的情況能不能重復(fù)，即有沒(méi)有重現(xiàn)性，如果沒(méi)有重現(xiàn)性，那只能說(shuō)明是偶然誤差，可能由于電壓不穩(wěn)啊，震動(dòng)等原因造成的。可重新測(cè)定一次或多次取平均值即可。
2. 檢查是否操作不當(dāng)
經(jīng)常做試驗(yàn)的時(shí)候，有時(shí)候發(fā)現(xiàn)自己的數(shù)據(jù)不平行，俺就會(huì)反過(guò)來(lái)重頭檢查一下。先檢測(cè)比色皿在上機(jī)的時(shí)候是否擦拭干凈。這個(gè)很重要，有時(shí)擦拭不干凈，會(huì) 造成0.010左右的吸光值的偏差，即使是同一溶液上兩次儀器，也會(huì)出現(xiàn)這種誤差，主要是由于比色皿沒(méi)有擦拭干凈的原因。至于比色皿需要配對(duì)使用（對(duì)于老 儀器），或采用扣除池空白的方式（對(duì)于有此功能的新儀器），俺就不在此啰嗦了。
對(duì)于拉桿式的儀器，要將拉桿復(fù)位。俺就鬧過(guò)一個(gè)笑話，印象很深刻的。一個(gè)顏色特別深的時(shí)候，上機(jī)發(fā)現(xiàn)吸光值為零。俺還檢查了很多方面，看前處理是否出了問(wèn) 題，看波長(zhǎng)是否在zui大吸收處，是不是儀器不穩(wěn)定，檢查了一大圈，都沒(méi)有問(wèn)題啊，而且目視顏色很深啊。查來(lái)查去發(fā)現(xiàn)，儀器光路對(duì)準(zhǔn)第二個(gè)比色皿位置，而俺的 樣品溶液在*個(gè)比色皿位置上。哎，大家別笑話，真人真事，讓大家見(jiàn)笑了。這里就要建議大家養(yǎng)成良好的習(xí)慣，使用完畢后一定要將拉桿復(fù)位，如果儀器不是一 個(gè)人使用，別人可能習(xí)慣不好，自己在試驗(yàn)的過(guò)程中一定要親自檢查一下。
3 . 電壓不穩(wěn)或光源不穩(wěn)
上面兩個(gè)方面都沒(méi) 有涉及儀器本身的問(wèn)題，下面說(shuō)說(shuō)儀器方面。若果1.1.1和1.1.2您都做的很好，那有可能出現(xiàn)以下問(wèn)題。如果您所在實(shí)驗(yàn)室電壓不穩(wěn)，也有可能造成儀器 不穩(wěn)定。據(jù)俺了解，儀器里面好像內(nèi)置了穩(wěn)壓系統(tǒng)。如果檢查出來(lái)是由于電壓不穩(wěn)定造成的，建議安裝穩(wěn)壓電源等裝置。這種情況好像比較少見(jiàn)啊。
光源問(wèn)題是大家容易忽略的問(wèn)題，先看看氘燈和鎢燈的能量圖，如下：
圖2 氘燈和鎢燈的能量圖
建議大家新儀器備份一個(gè)能量圖，如果發(fā)現(xiàn)儀器不穩(wěn)定的話，可以做一個(gè)能量圖，和原來(lái)的能量圖比較，看看能量是否下降的很厲害，如果下降的很厲害，可能是光 源出問(wèn)題了，建議更換光源燈。尤其是氘燈，壽命一般比鎢燈短，所以使用時(shí)更要注意，如只使用可見(jiàn)光區(qū)，等儀器自檢完畢后，可利用軟件關(guān)閉氘燈，這樣可以節(jié) 省氘燈。如果在紫外區(qū)，且長(zhǎng)時(shí)間不用的話，也可以暫時(shí)關(guān)閉氘燈。對(duì)于721等老儀器，沒(méi)有氘燈使用計(jì)時(shí)等功能和能量掃描功能的儀器，可以自己設(shè)計(jì)一個(gè)氘燈 使用記錄，每次記錄氘燈使用的時(shí)間，等過(guò)了半衰期及時(shí)更換。
在更換光源的時(shí)候，先建議讓儀器廠家的人來(lái)更管。如果條件不許的話，自己更換，一定要帶手套，裝上以后要對(duì)燈的位置進(jìn)行調(diào)節(jié)。
4. 檢測(cè)器問(wèn)題
還有可能是檢測(cè)器的問(wèn)題，老儀器一般都用光電管作為檢測(cè)器，新儀器一般都使用光電倍增管。無(wú)論那種，對(duì)檢測(cè)器的保護(hù)，對(duì)儀器的保養(yǎng)一定要做好。之前由一個(gè) 版友儀器壞了，就是由于長(zhǎng)時(shí)間不用，里面電子元件受潮老化導(dǎo)致。所以，要定期的對(duì)儀器進(jìn)行維護(hù)，及時(shí)更換干燥劑，保持儀器干燥。長(zhǎng)時(shí)間不用，可定期開(kāi)機(jī)， 這樣里面的電子元件本身會(huì)發(fā)熱，驅(qū)除潮氣。如果檢測(cè)器壞了，就要請(qǐng)廠家的專業(yè)人員來(lái)更換了。
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